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过表达miRNA

  miRNA过表达

  细胞内载体过表达是常用的过表达miRNA方式。
过表达pri-miRNA序列

  如下图,miRNA的过表达载体中有插入成熟miRNA、pre-miRNA及pri-miRNA序列三?#20013;?#24335;。其中pri-miRNA(含侧翼序列)的方式由于保留了每个microRNA独自的原始天然双臂结构,效果更好,是应用最为广泛的方法。

  启动子选择

  中洪博元公司的microRNA过表达系统中有CMV启动子(II型启动子)和H1启动子(III型启动子)两种方式供选择。
 
  III型启动子(H1、U6等)具有表达效率高、有效的确定终止位置等优点,成为首选;
II型启动子适用于pri-miRNA序列中有连续的5个T-导致III型启动子(CMV、Ubi等)终止转录的情况。
载体选择
  中洪博元公司有基于慢病毒、腺病毒、质粒等的载体表达系统满足不同实验的需要。
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