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细胞瞬时转染

原理:
       通过 脂质 体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶 基因表达 的检测等实验。


应用:

       观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(短时间即可进行观察,但效应会很快丢失)。


一般流程:

       1)细胞接种:转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%~80%覆盖。
       2)细胞转染(脂质体、电穿孔、FuGENE6等)
       3)48小时以后鉴定目的基因的表达情况。


前期准备:

       构建好的外源基因载体,或目的基因基本信息。
       待转染的细胞系(1×106个细胞,可传代,倍增时间小于48小时)以及 细胞培养 条件的说明。
       若需要检测靶基因的表达,请提供相应抗体 。


结果呈现:

       构建好的瞬时转染细胞及相关的外源基因表达分析。


       (本文转载丁香通

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